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一、原理
在中性条【tiáo】件下用过硫酸【suān】钾使式样【yàng】消解，将式样所含磷全部氧化为正【zhèng】磷【lín】酸盐，在酸性【xìng】介质中【zhōng】，正磷酸盐【yán】与钼【mù】酸【suān】铵反映，在锑盐存在下，生成磷【lín】钼杂多【duō】酸，立【lì】即被【bèi】抗【kàng】坏血酸还原，生成蓝色络合物。
二、所需试剂
1、过硫酸钾，50g/L，5g过硫酸钾，纯水定容100ml。
2、抗坏【huài】血【xuè】酸，100g/L，10g抗坏【huài】血酸，纯【chún】水定容100ml。
3、硫酸，体积比1：1，150ml纯水：150ml浓【nóng】硫酸，体【tǐ】积【jī】300ml（硫酸配制时注【zhù】意要【yào】将【jiāng】硫酸缓缓倒入水中，切勿将水【shuǐ】倒【dǎo】入硫酸中，避【bì】免发生危险，混合使【shǐ】用【yòng】有水冷却）。
4、钼酸盐溶液【yè】，13g钼酸铵，纯水定【dìng】容【róng】100ml，0.35酒石酸锑【tī】钾【jiǎ】纯水定容100ml，
不断搅拌先将钼酸铵【ǎn】溶液缓缓倒入300ml（3试【shì】剂）硫酸溶液中【zhōng】，然【rán】后【hòu】加【jiā】入配置好的酒石【shí】酸锑钾溶液缓和均匀。
5、浊度【dù】色度补偿液，纯水【shuǐ】：浓硫酸【suān】：抗【kàng】坏血酸溶液（2试【shì】剂）=1:1:1，体【tǐ】积比。
（式样【yàng】浑浊时，多做一个空白式样（所取水样，非空白用纯【chún】水【shuǐ】）加入此补偿【cháng】液【yè】，加入过硫酸【suān】钾与其他式样【yàng】一同消【xiāo】解，不加抗坏血酸及钼【mù】酸盐溶液显色【sè】）。
三、试样制备
1、取25ml所【suǒ】采【cǎi】水样，于50ml比色管【guǎn】中，共计两组【zǔ】，含一个平行样，取纯水25ml做空白样，取7.5ml磷标准使用溶液【yè】（2ug/ml），定容至25ml，做标曲【qǔ】中间校【xiào】核式样，共计4组【zǔ】式样，若有多【duō】家式样同时分析【xī】，只增加平【píng】行样【yàng】及式样【yàng】，即每家增加【jiā】两组式【shì】样，不【bú】增【zēng】加空白式样和标【biāo】曲中间校核式样。
2、含浊度补偿液式样的准备【bèi】，针对浑浊的【de】水样，即多增加一个采集式样，加过硫【liú】酸【suān】钾消解，然后加入色度补【bǔ】偿液【yè】，不加抗坏血酸【suān】和钼酸【suān】盐【yán】溶液【yè】进【jìn】行显色。
四、式样消解
所有制备好的【de】式样中（含空白【bái】式样【yàng】及【jí】色度补【bǔ】偿式样），都加入4ml过【guò】硫酸【suān】钾溶液（50g/L）,用布和线将【jiāng】比色管的玻璃塞扎紧【jǐn】，至于高压蒸汽锅中加【jiā】热，蒸汽锅压【yā】力【lì】为0.11mpa，温度120℃左右，消解30分钟，然后取出，冷却至室温，制得消【xiāo】解【jiě】液。
五、显色
在消【xiāo】解液中加入1ml抗坏血【xuè】酸（100g/L），混【hún】合均匀，30秒【miǎo】后加入2ml钼【mù】酸铵溶液【yè】，混合【hé】均匀，静置15分钟。（添加【jiā】过浊度补偿【cháng】液【yè】的【de】式样【yàng】不【bú】添加【jiā】抗坏血酸溶液和钼酸铵溶液，添加【jiā】3ml浊度补偿液）。
六、分光光度测试
光程30mm比【bǐ】色皿，700nm波长，以纯【chún】水做参比（既以纯水校准分管【guǎn】光【guāng】度计的【de】透光率），分【fèn】别【bié】测定式样【yàng】中的【de】吸【xī】光度，然后【hòu】扣除空白式样的吸光度。添加浊度补偿的式样【yàng】，同样测试吸光度，用同【tóng】批次显色式【shì】样【yàng】吸光度扣【kòu】除浊度补偿吸光【guāng】度，再【zài】扣除空白式样吸光度。
七、标准曲线制作
取【qǔ】总磷标准溶【róng】液（1mg/mL）1ml，纯水定容至500ml，配制成2ug/ml的标【biāo】准使用液【yè】，取7支50ml具【jù】塞比色管，分别加入标准使用液，0ml，0.5ml，1ml，3ml，5ml，10ml，15ml，纯水定容至25ml，重复第四【sì】、第五，第六部分，测得吸光【guāng】度，然后用excel表格，绘【huì】制出【chū】标准【zhǔn】曲线，相【xiàng】关【guān】系数在0.9990以上。
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